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                                        干貨 | 培養(yǎng)液選配 7 個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，太實(shí)用了! 
                                                               作者：毛博 
培養(yǎng)液是人工模擬細(xì)胞體內(nèi)生長(zhǎng)的生存環(huán)境，對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)起著關(guān)鍵性作用。在這方面，毛
博（文章作者）走了彎路之后得到一些寶貴的經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)，都是來(lái)自實(shí)戰(zhàn)一線的干貨，字字血聲聲淚， 先貢獻(xiàn)給大家。 
  

 
                                                  培養(yǎng)基，原配的總是合適的 
 
選擇培養(yǎng)基沒有一定的標(biāo)準(zhǔn)，某種培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞，某種細(xì)胞也可以在不同培養(yǎng)液
中生長(zhǎng)。但是，建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞first choice培養(yǎng)基。可以查閱
參考文獻(xiàn)，或在購(gòu)買細(xì)胞株時(shí)咨詢。例如，小鼠細(xì)胞株多選 1640；進(jìn)行細(xì)胞雜交，基因轉(zhuǎn)移 實(shí)驗(yàn)，可選擇 IMDM。 另外，本實(shí)驗(yàn)室用慣了的培養(yǎng)基不妨一試。這些都是師兄師姐們用 了幾十年了?？隙ê糜玫?。  
  
                                            1640 還是 DMEM，取決于你發(fā)文章的決心 

1640 的確是非常便宜的培養(yǎng)基，也很好用。所以在國(guó)內(nèi)的實(shí)驗(yàn)室中，用的非常非常多。但 是，它的緩沖力弱，所以有時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)有影響，尤其是一些實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期傳代狀 態(tài)不好的細(xì)胞。所以，毛博很敗家地推薦：為了早點(diǎn)出文章，有條件還是用 DMEM，當(dāng)然不 是昂貴的 GIBCO 公司的，實(shí)在是太貴了。HYCLONE 的砍砍價(jià)，干粉很便宜，但是明顯雜質(zhì)和 質(zhì)量不如 GIBCO。一分價(jià)錢一分貨。真的是真理哈。 
  
                                                         2 到 3 周的量，多了也是浪費(fèi) 
 
一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，應(yīng)該在 2 到 3 周內(nèi)用完它。因?yàn)?，一些抗生?和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。2-3 周后就降解完了。所以，一次少配一點(diǎn)，就 不要偷懶了。 
  
                                                                    慎用碳酸氫鈉 
 
培養(yǎng)基的 pH 值隨著碳酸氫鈉量的增加，呈拋物線增長(zhǎng)，當(dāng)碳酸氫鈉加到一定量時(shí)，pH 變化 越來(lái)越小。而培養(yǎng)基的滲透壓值隨著碳酸氫鈉量的增加，呈直線增長(zhǎng)，碳酸氫鈉量越大，滲
培養(yǎng)基變成了高滲溶液，細(xì)胞會(huì)脫水萎縮滴。 
  
                                                                     血清分裝防膨脹 

必須貯存于–20 ～ -70℃，若存放于 4℃，如同第三條所說(shuō)的，2～3 周就降解了。教大家一 個(gè)小竅門：可將 1 瓶 500ml 的血清，每次 40～45 ml 分裝于無(wú)菌 50 ml 離心管中，由于血清 結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約 10 %， 必須預(yù)留此膨脹體積 5～10ml，否則會(huì)把離心管凍裂滴。  
  
                                                                  血清解凍，慢是* 

血清的解凍和細(xì)胞的解凍正相反：細(xì)胞是越快越好；血清是越慢越好。血清解凍步驟: -20℃ 或–70℃冰箱拿出來(lái)，放到 4℃冰箱，放一天。在這一天中，時(shí)不時(shí)地去搖晃一下，使溫度與 成分均一，減少沉淀的發(fā)生。一天過(guò)后，拿出來(lái)放到室溫下，等血清恢復(fù)室溫了，再分裝。  
 
                                                                  熱滅活？別上它的當(dāng)！ 
 
掌握一條原則：除非必須，一般不要熱滅活，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物顯著增多，且會(huì)影響血清的 品質(zhì)。這些沉淀物在顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常誤以為是血清遭受污染，又去過(guò)濾 呀什么的，無(wú)端增加沒有必要的工作量。這里毛博提醒大家：一般不要熱滅活。