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      人胚胎干細胞(ESC)初由干細胞研究 James Thomson等人于1998年獲得，在當時的研究中，他們將ESC培養(yǎng)在有絲分裂滅活的小 鼠胚胎成纖維細胞(MEF)上，并使用添加20%胎牛血清(FBS)及其他成分的培養(yǎng)基^[1]。這項開創(chuàng)性的工作成為開發(fā)各種多能性干細胞(PSC)培養(yǎng)系統(tǒng)的起點。為了降低異種蛋白和外來物質的污染風險，人們將MEF替換為人源的細胞，包括人成纖維細胞 ^[2–4]。為了進一步減少可變成分和動物性原料，人們將FBS替換為Gibco KnockOut血清替代物(KnockOut SR，一種用于 不含F(xiàn)BS、用于有滋養(yǎng)層培養(yǎng)的添加物) ^[2–4]。后來，人們開發(fā)出*不需要滋養(yǎng)層細胞的PSC培養(yǎng)基和基質。2011年，故事又回到它開始的地方，Thomson實驗室開發(fā)了一款成分*明確的無滋養(yǎng)層PSC培養(yǎng)系統(tǒng)，它不含任何動物性成分，可使PSC在未分化狀態(tài)下生長^[5]，這也就是后來大名鼎鼎的Gibco Essential 8培養(yǎng)基。

成分更明確的培養(yǎng)基的優(yōu)點

PSC培養(yǎng)系統(tǒng)的發(fā)展很大程度上是受到人們想得到適合臨床應用的 PSC這一想法驅動的，但是從血清培養(yǎng)基轉變?yōu)槌煞指鼮槊鞔_的培養(yǎng)基本身也是有意義的。血清成分復雜，不同批次的產(chǎn)品之間可能相差甚大，既可能對PSC有益，也可能對其有害^[6]。與含血清的培養(yǎng)基不同，成分更明確的培養(yǎng)基的組分更為一致，減少了其中的有害成分，保留了對PSC維持關鍵的一些成分^[5]。因此，即使在非轉化應用領域中，使用成分更明確的培養(yǎng)基也有優(yōu)勢。

 一次跨越：經(jīng)驗證比FBS更可靠

 Gibco KnockOut血清替代物—多種屬 (KnockOut SR-Multi-Species，Knock- Out SR-MS)所用配方與20多年來被數(shù)千篇文章引用的KnockOut SR相同， 這種PSC培養(yǎng)添加物可以1:1的比例直接替代有滋養(yǎng)層培養(yǎng)中所用的FBS。KnockOut SR-MS采用成分更明確的無FBS配方，在諸如PSC培養(yǎng)和擴增等多種應用領域中均有優(yōu)勢。我們將文獻中發(fā)布的KnockOut SR-MS與FBS相比在人和小鼠PSC中應用的優(yōu)勢總結如下(比較結果匯總于表1中)。

 表1：血清與KnockOut SR – 多種屬(KSR–MS)中使用的KnockOut SR配方比較。

 又一次跨越：只提供細胞所需，不提供多余物質

為什么又一次跨越，又為什么是8? 許多無滋養(yǎng)層干細胞培養(yǎng)基配方中包含20或更多種組分。這些培養(yǎng)基可以充分支持PSCs的生長和維持，但同時也包含諸多變量，常常出現(xiàn)批次間不一致的現(xiàn)象。Essential 8培養(yǎng)基去除了高度不確定的蛋白(如BSA)和其他組分，只包括PSC培養(yǎng)必需成分，有助于降低培養(yǎng)差異。此外，Essential 8培養(yǎng)基在符合cGMP要求的條件下生產(chǎn)，進一步降低了批次間差異，使可變結果和非預期的細胞分化風險小化。

 表2. 已發(fā)表的某品牌m培養(yǎng)基和 Essential 8培養(yǎng)基在支持 PSC 生長和擴增所需的組分數(shù)量上存在顯著差異。

 更高的追求：向多能性干細胞細胞治療更進一步

多能干細胞治療研究推進到臨床應用需要謹慎選擇起始材料，因為其質量顯著影響終的干細胞治療產(chǎn)品的性質。Gibco細胞治療系統(tǒng)（CTS）產(chǎn)品為臨床干細胞療法以及免疫療法的研究和生產(chǎn)提供了可靠的選擇。

Gibco CTS Essential 8培養(yǎng)基符合有關細胞療法的法規(guī)要求，是面向全求市場、用于人多能性干細胞(PSC)的非動物源性培養(yǎng)基。CTS Essential 8 培養(yǎng)基已經(jīng)用重組蛋白取代了人類來源的成分，從而在全求范圍內生產(chǎn)出無動物源性成分且無飼養(yǎng)層GMP 產(chǎn)品。CTS Essential 8培養(yǎng)基以Gibco Essential 8培養(yǎng)基為基礎，可實現(xiàn)從實驗室到臨床的無縫過渡。

其優(yōu)點主要是：

● 成分*確定，無人源和動物源性材料

● cGMP等級，經(jīng)過外源物質檢測

● 可提供相關法規(guī)文件(如向FDA已提交DMF/藥物主文件備案)

 表3：Essential 8培養(yǎng)基與CTS Essential 8培養(yǎng)基特點對比。

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