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人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞

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詳細(xì)介紹
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應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)

HK-2(人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞屬源于正常腎的近曲小管細(xì)胞,通過導(dǎo)入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉(zhuǎn)染外生包裝細(xì)胞Psi-2;Psi-2細(xì)胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細(xì)胞系PA317,zui后將PA317細(xì)胞產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細(xì)胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH分析顯示,HK-2細(xì)胞來源于單克隆。PCR檢測證實,HK-2細(xì)胞基因組中含有E6/E7基因。

細(xì)胞名稱:HK-2(人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞
種屬:人
年齡(性別):男;16歲
組織來源:外周血;B淋巴母細(xì)胞;Burkitt's淋巴瘤
生長特性:懸浮
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣 
生長培養(yǎng)基
RPMI-1640(貨號:PM150110)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃

說明

規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
特點:細(xì)胞代數(shù)為4代以內(nèi)包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;
說明書細(xì)胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運輸方式:快遞運輸
售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決!上海雅吉生物與您攜手共進(jìn)!以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請及時或郵件。需要特別指出的是:如細(xì)胞出現(xiàn)問題,請于48h內(nèi)及時反饋,本公司將竭誠為您服務(wù)!
一.貼壁細(xì)胞 客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。 Hela人宮頸癌細(xì)胞
二.懸浮細(xì)胞
 1. 接收到,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
三.一毫升小管操作方法 小管內(nèi)也是此細(xì)胞。
 1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)
2. 嚴(yán)格無菌操作,用吸管吸出管中細(xì)胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
 4.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO7 培養(yǎng)。

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