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技術文章
  • 4 2019-12
    細胞凍存液的操作步驟和注意事項

    細胞凍存和復蘇操作步驟:細胞凍存和復蘇采取“慢凍快融”的原則,慢速冷凍可使細胞內(nèi)的水份滲出細胞外,減少細胞內(nèi)形成冰晶的機會,快融以保證細胞外結晶快速融化,避免慢速融化水份滲入細胞內(nèi),再次形成胞內(nèi)冰晶造成對細胞的損傷。(一)細胞凍存1.配制含的細胞凍存液,預冷(新鮮配制的凍存液會產(chǎn)生大量的熱);2.取對數(shù)生長期的細胞,用細胞消化酶將單層生長的細胞消化下來;懸浮細胞則直接將細胞收集到離心管中;3.離心;4.去除上清液,逐漸加入適量預冷的細胞凍存液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),...

  • 27 2019-11
    gibco澳洲胎牛血清生產(chǎn)的縱向整體化管理

    gibco澳洲胎牛血清生產(chǎn)的縱向整體化管理從血液收集到終產(chǎn)品檢驗和內(nèi)部稽核的每一個步驟,GIBCO都采用設備和標準操作程序,這種嚴格的控制可保證產(chǎn)品的高品質(zhì)和低的批間差??勺粉櫺裕篻ibco澳洲胎牛血清品質(zhì)的GIBCO收集并保留從采血、處理、檢測到發(fā)運的全部文件供追蹤之用。采血gibco澳洲胎牛血清采用心臟穿刺的方法采血。馬血清采自供體動物。新生牛血清采自出生10至14天的小牛。全部按照工業(yè)標準采血。處理全部血清:收集的血液均在冷藏條件下處理。血清和凝塊分離后立即將血清合并并...

  • 25 2019-11
    熒光定量的原理與檢測 

    熒光定量的原理:熒光定量是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,熒光定量反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已...

  • 22 2019-11
    流式細胞術實驗手冊

    流式細胞術(flowcytometery)是利用流式細胞儀(flowcytometer)對快速直線流動狀態(tài)中的單列細胞或生物顆粒等進行逐個、多參數(shù)、快速的定性、定量分析或分選的技術,具有檢測速度快、測量參數(shù)多、采集數(shù)據(jù)量大、分析信息全面、分選純度高、方法靈活等特點,可用于細胞大小、細胞顆粒度、DNA及RNA含量、蛋白質(zhì)含量、細胞特異抗原、細胞活性、胞內(nèi)PH值、細胞周期、細胞凋亡、細胞功能分析等的檢測。自20世紀70年代以來,隨著流式細胞水平的日益提高,該技術已被廣泛應用于細胞...

  • 18 2019-11
    如何解凍sigma試劑血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損

    如何解凍sigma試劑血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損sigma試劑血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛,血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。sigma試劑血清含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能,其作用如下:1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,...

  • 15 2019-11
    胎牛血清

    一、胎牛血清各項質(zhì)量指標符合2005版《中華人民共和國藥典》第三部附錄的要求。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量3.5%~5.0%(w/v)3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)4、無菌檢驗陰性5、支原體檢驗陰性6、細菌內(nèi)毒素≤5(EU/ml)7、牛腹瀉病毒陰性8、大腸桿菌噬菌體陰性9、支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)大增殖濃度≥2.5×106個/ml細胞倍增時間≤15h克隆率≥85%血清的主要成分編輯血清是由血漿去除纖...

  • 13 2019-11
    一文看懂線粒體膜電位、線粒體質(zhì)量、線粒體ROS檢測染料及其優(yōu)缺點

    原創(chuàng):niwanmao流式中文網(wǎng)昨天線粒體是細胞代謝的重要介質(zhì),是活性氧(ROS)的產(chǎn)生者和靶點,是ATP水平和鈣穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)劑,也是參與氨基酸、脂質(zhì)和核苷酸合成的生物合成途徑的樞紐。線粒體存在于所有細胞中,它們的大小、形狀和數(shù)量不同,這取決于細胞、基礎組織和其他一些因素的代謝需求??紤]到它們在細胞和機體功能中的關鍵作用,在許多遺傳和非遺傳疾病以及癌癥和衰老中觀察到線粒體(mt)功能障礙并不奇怪。在絕大多數(shù)情況下,mt功能障礙的顯著特征包括mt膜電位(mtmP)、mt質(zhì)量和氧化...

  • 29 2019-10
    標準胎牛血清血源

    目前國內(nèi)標準胎牛血清的主要指標有以下幾點:1、內(nèi)毒素標準為不高于5EU/ml。內(nèi)毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高,如Gibco26140,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清質(zhì)量也未見影響??梢?,內(nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量,除非含量*,預示著已經(jīng)污染。2、總蛋白含量胎牛血清一般范圍是30-40...

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