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PCR熒光定量在分子生物學研究中的應用

更新時間:2022-02-22瀏覽:940次

  PCR熒光定量在分子生物學研究中的應用:
 
  1、核酸定量分析:對傳染性疾病進行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的檢測,比如近期流行的甲型H1N1流感,轉(zhuǎn)基因動植物基因拷貝數(shù)的檢測,RNAi基因失活率的檢測等。
 
  2、基因表達差異分析:比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達差異(如藥物處理、物理處理、化學處理等),特定基因在不同時相的表達差異以及cDNA芯片或差顯結(jié)果的確證。
 
  3、SNP檢測:檢測單核苷酸多態(tài)性對于研究個體對不同疾病的易感性或者個體對特定藥物的不同反應有著重要的意義,因分子信標結(jié)構(gòu)的巧妙性,一旦SNP的序列信息是已知的,采用這種技術(shù)進行高通量的SNP檢測將會變得簡單而準確。
 
  4、產(chǎn)前診斷:人們對遺傳性物質(zhì)改變引起的遺傳性疾病還無法治療,到目前為止,還只能只能通過產(chǎn)前監(jiān)測,減少病嬰出生,以防止各類遺傳性疾病的發(fā)生,如為減少X連鎖遺傳病患兒的出生,從孕婦的外周血中分離胎兒DNA,用實時PCR熒光定量檢測其Y性別決定區(qū)基因是一種無創(chuàng)傷性的方法,易為孕婦所接受。
 
  5、藥物療效考核:對乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)定量分析顯示:病毒量與某些藥物的療效關系。HCV高水平表達,干擾素治療作用不敏感,而HCV低滴度,干擾素作用敏感;在拉米夫定治療過程中,HBV-DNA的血清含量曾有下降,隨后若再度上升或超出以前水平,則提示病毒發(fā)生變異。
 
  6、病原體檢測:采用PCR熒光定量檢測技術(shù)可以對淋球菌、沙眼衣原體、解脲支原體、人類乳頭瘤病毒、單純皰疹病毒、人類免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、結(jié)核分枝桿菌、EB病毒和巨細胞病毒等病原體進行定量測定。與傳統(tǒng)的檢測方法相比具有靈敏度高、取樣少、快速簡便等優(yōu)點。

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